1. Perkenalan
Potassium 4-methoxysalicylate (4MSK), dengan struktur yang mirip dengan asam salisilat, adalah bahan pemutih obat baru yang digunakan dalam kosmetik untuk tindakan memutihkannya dan merupakan bahan berkhasiat dalam kosmetik. Ini memiliki kemampuan untuk meningkatkan keseimbangan warna kulit, menghilangkan pigmentasi berlebihan, memperbaiki proliferasi atipikal epidermis, meningkatkan ekskresi melanin dan mencegah bintik-bintik dan bintik-bintik.

2. Fungsi Utama
Pigmentasi, bintik-bintik dan ketidakjelasan merupakan masalah bagi banyak wanita Asia dan oleh karena itu produk pencerah kulit sangat diminati oleh wanita Asia. Kemanjuran potasium 4-methoxysalicylate telah dipelajari oleh perusahaan kosmetik terkemuka dan hasilnya ditunjukkan di bawah ini.
2.1. Penghambatan melanogenesis
Sel melanoma tikus (B16) dikultur selama tiga hari dengan ada dan tidak adanya 4MSK, dan jumlah sel dan jumlah melanin yang diproduksi pada jumlah sel tertentu diukur. Rasio jumlah sel dan jumlah melanin dengan adanya 4MSK dengan jumlah melanin tanpa 4MSK diperoleh dan efek 4MSK pada melanogenesis dianalisis dengan cara ini.
Hasil menunjukkan bahwa jumlah sel dan jumlah melanin setelah 3 hari penambahan 4MSK ditunjukkan pada Gambar 2. Dipastikan bahwa 4MSK memiliki efek penghambatan yang bergantung pada konsentrasi pada melanogenesis, dan hasil uji Williams ditemukan signifikan secara statistik untuk gugus tambahan 3 x 10-4 dan 10-3 mol/L bila dibandingkan dengan tidak adanya penambahan 4MSK. Namun, tidak ada efek pada proliferasi sel yang ditemukan untuk salah satu konsentrasi 4MSK yang diuji.

2.2. Impedansi aktivitas kuraminidase
Untuk evaluasi aktivitas tirosinase dalam sistem non-seluler, substratnya adalah L-DOPA dan jumlah produksi dopakrom yang dihasilkan dari metabolismenya diuji dengan uji absorbansi 475 nm .
Tingkat impedansi aktivitas tirosinase oleh 4MSK ditentukan dengan menambahkan larutan 4MSK dan lisat ke sistem reaksi di atas dan membiarkan campuran ini bereaksi selama 90 detik pada suhu kamar, menghasilkan rasio nilai yang diuji ketika larutan 4MSK ditambahkan dibandingkan dengan kelompok lisat.

2.3. Penghambatan efek yang diinduksi UV pada diferensiasi keratinosit
Segera setelah model kulit 3D disinari dengan sinar UV, larutan 4MSK ditambahkan ke permukaan model kulit, diinkubasi selama 30 menit kemudian 4MSK dikeluarkan dan diinkubasi selama 1 hari. Solusi 4MSK digantikan oleh media lisis untuk tujuan kontrol. Model kulit yang diambil sampelnya setelah inkubasi diwarnai dengan antibodi anti-tropin untuk studi imunohistokimia dan RT-PCR instan (reaksi berantai transkripsi-polimerase terbalik) untuk kuantifikasi ekspresi tropin mRNA.
Sebagai hasil studi imunohistokimia dengan antibodi anti-trofoblas, model kulit tiga dimensi mirip dengan uji in vivo, dengan adanya protein trofoblas, penanda diferensiasi, di sekitar lapisan granular. Setelah satu hari inkubasi model kulit ini di sumur UV, ekspresi troponin menurun. Penambahan 4MSK ke model kulit segera setelah iradiasi UV secara signifikan menekan penurunan ekspresi troponin akibat UV.
Selanjutnya, analisis kuantitatif PCR dari RNA yang diekstraksi dari model kulit yang sama menunjukkan bahwa penurunan ekspresi mRNA dari taurolithionein pada kelompok yang disinari UV ditekan pada kelompok yang ditambahkan 4MSK. Hasil dikonfirmasi oleh studi imunohistokimia, yaitu penurunan ekspresi troponin pada tingkat protein dan penekanan penurunan ekspresi 4MSK, juga dikonfirmasi pada tingkat mRNA.

2.4 Efek pertahanan pigmentasi manusia
Dua belas sukarelawan pria dewasa yang sehat dipaparkan ke panjang gelombang UVA dan UVB di 4 lokasi di perut selama 3 hari menggunakan sumber sinar UV buatan yang setara dengan lMED (dosis eritema minimal) sekali sehari untuk setiap subjek uji. Empat krim, 1 persen , 3 persen , 5 persen 4MSK dan krim dasar digunakan sebagai sampel uji dan dioleskan 3 kali sehari selama 7 hari sejak awal paparan sinar UV. Untuk mengevaluasi tingkat hiperpigmentasi, warna kulit sebelum dan sesudah aplikasi diukur dua kali dengan penguji warna dan dirata-rata untuk mendapatkan jumlah perubahan sebelum dan sesudah paparan, membandingkan area di mana konsentrasi krim 4MSK yang berbeda diaplikasikan dengan area di mana krim dasar diterapkan.
Semua 12 subjek laki-laki digunakan sebagai subjek. Usia rata-rata subjek adalah 38,4 tahun. Nilai L* untuk setiap lokasi aplikasi sebelum aplikasi benda uji ditunjukkan pada Tabel-la. Nilai L* dianalisis pada setiap lokasi uji sebelum bahan uji diterapkan dan dipastikan bahwa tidak ada perbedaan warna kulit antara lokasi sebelum uji dimulai.
Nilai ΔL untuk setiap tempat uji sebelum benda uji diaplikasikan dan 7 hari setelah aplikasi ditunjukkan pada Gambar di bawah ini. ΔL situs aplikasi dengan krim 4MSK 1 persen secara statistik secara signifikan lebih kecil daripada ΔL situs aplikasi dengan krim dasar. Selanjutnya, ΔL menjadi semakin kecil dengan meningkatnya konten 4MSK, sehingga menyimpulkan bahwa 4MSK memiliki efek anti-pigmentasi yang bergantung pada dosis. Selain itu, tidak ada kelainan kulit seperti pembengkakan, kemerahan atau kanker gatal yang diamati selama periode pengujian.

2.5. Meningkatkan ketidakseimbangan proliferasi dan diferensiasi keratinosit dan mempromosikan pelepasan melanin yang lancar
Studi pada melanosit telah menunjukkan penghambatan melanogenesis yang signifikan pada konsentrasi 3 x 10-4 mol/L, dengan potensi penuh dibandingkan dengan bahan aktif pemutih yang ada. Studi tentang mekanisme aksi penghambatan produksi melanin, dan apakah aktivitas enzim kuraminidase, yang diperlukan untuk produksi melanin, terhambat, telah menunjukkan bahwa 4MSK tidak hanya menghambat produksi melanin, tetapi juga memiliki efek menghambat aktivitas kuraminidase.
Diketahui bahwa penyebab utama pigmentasi adalah sinar UV, yang menyebabkan kelainan sementara pada ekspresi penanda diferensiasi pada sel pembentuk keratin. Berdasarkan temuan kami bahwa ketidakseimbangan penanda diferensiasi bersifat kronis bahkan tanpa radiasi UV di lokasi pigmentasi, kami melakukan penelitian tentang normalisasi penanda diferensiasi dengan 4MSK. Menggunakan model kulit tiga dimensi, kami telah menunjukkan bahwa 4MSK memiliki efek pertahanan terhadap ekspresi tropomiosin yang tidak seimbang, penanda diferensiasi keratinosit, baik pada tingkat mRNA maupun protein.

Kedua, uji in vivo telah mengonfirmasi bahwa produk uji yang mengandung 15 persen 4MSK memiliki efek pertahanan yang bergantung pada konsentrasi terhadap pigmentasi UV. Tidak ada kelainan kulit yang diamati selama seluruh periode pengujian karena penggunaan produk uji yang mengandung 4MSK, yang menjadikan 4MSK aman dan efektif sebagai bahan kosmetik.
Studi in vitro telah mengkonfirmasi efek penghambatan langsung 4MSK pada melanogenesis dan efeknya pada proliferasi dan diferensiasi sel pembentuk keratin. Kedua tindakan ini memiliki efek defensif pada produksi dan pelepasan melanin, yang menyebabkan penumpukan melanin berlebih di kulit. Tes in vivo telah menunjukkan bahwa 4MSK adalah pertahanan yang sangat baik terhadap pigmentasi UV dan oleh karena itu dipercaya bahwa 4MSK juga efektif melawan pigmentasi, bintik-bintik dan kusam dalam bentuk melanin kulit berlebih.

3. Aplikasi

Kalium 4-metoksisalisilat terutama digunakan dalam produk kosmetik.

4. Bagan Alir

2,4-Asam dihidroksibenzoat → tambahkan larutan berair basa natrium hidroksida → larutkan → dinginkan → → sesuaikan PH → endapan → sentrifus → bilas → keringkan → mentah 4-asam methoksisalisilat → panaskan → aduk → ekstrak filter → kering → 4-asam methoxysalicylic murni → sesuaikan PH → aduk 3 → pulihkan pelarut → dinginkan kristalisasi → ekstrak filter → 4-mentah mentah 4-kalium asam methoxysalicylic → larutkan minyak mentah → dekolorisasi → ekstrak filter → dinginkan kristalisasi → vakum kering → murni 4-kalium asam metoksisalisilat

5. Standar Kualitas

Menurut Standar Perusahaan

Item	Spesifikasi	Hasil
Penampilan	Serbuk putih hingga putih pudar	bubuk putih
Identifikasi	HPLC, NMR, LC-MS	Sesuai dengan Standar
Logam Berat	Kurang dari atau sama dengan 20ppm	<20ppm
Sebagai	Kurang dari atau sama dengan 2ppm	<2ppm
Kehilangan pengeringan	Kurang dari atau sama dengan 0,5 persen	0.29 persen
Pengotor tunggal	Kurang dari atau sama dengan 1.0 persen	Sesuai
Pengujian（HPLC）	Lebih besar dari atau sama dengan 98.0 persen	98,56 persen